Коллеги, добрый день. Подскажите, работал ли тут кто-то с самособирающимися

Question

Коллеги, добрый день. Подскажите, работал ли тут кто-то с самособирающимися

белками в крупные частицы, которые из мономеров собираются в полимеры, грубо говоря.
Интересует момент, может ли быть, что при измерении на спектрофотометре, 280 нм, концентрация у разобранных мономеров больше, чем концентрация собранных из них же больших частиц?

0

13.05.2024

5 ответов

34 просмотра

Maxim

Коллеги верно говорят про влияние рассеивания света. Но! По идее тогда у вас в образце с частицами концентрация была бы выше,т.к. тут поглощение+рассеивание. А у вас наоборот.

0

7 месяцев назад

Sergei

Добрый день, коллега. Киньте в нас спектр частиц и отдельных белков с той же самой концентрацией. В противном случае разговор затянется.

0

7 месяцев назад

Anna Vakhrusheva Автор вопроса

Sergei
Добрый день, коллега. Киньте в нас спектр частиц и...

Всем спасибо за обратную связь! Запрошу. Но в целом, там пик после 280 скатывается в ноль. Единственное, есть пик ещё на 230

0

7 месяцев назад

Anna

Добрый день! Я работаю с детекцией агрегации белков и наночастиц на спектрофотометре. Типична ситуация, когда оптическая плотность растет на 400+ нм, а при более низких длинах волн вследствие агрегации падает

0

7 месяцев назад

Павел Храмцов · Accepted Answer

чем больше размер частицы, тем больше она рассеивает свет, так что разница может быть. Мы с самособирающимися белками (по типу вирусных капсидов, например) не работали, но делали агрегаты из обычного альбумина. Там разница есть. Да собственно при измерении концентрации белка на 280 нм рекомендуют делать корректировку на мутность, т.е. измерять поглощение на 320 нм https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6463315/ Если там прямо частицы, то такая корректировка может и не помочь. Вот на рисунке спектры поглощения БСА и наночастиц диаметром около 150-170 нм по DLS, сделанных из того же БСА этанолом и температурной агрегацией (NP6, NP 7). Концентрация 1 мг/мл в обоих случаях

Похожие чаты

Коллеги, добрый день. Подскажите, работал ли тут кто-то с самособирающимися

5 ответов

Похожие вопросы