Здравствуйте, товарищи. Подскажите пожалуйста, кто-то пробовал сортить клетки по люминесценции,

Question

Здравствуйте, товарищи. Подскажите пожалуйста, кто-то пробовал сортить клетки по люминесценции,

а не флуоресценции? В интернетах мнения расходятся: одни говорят, что ничего не получится, другие знают того самого парня, который смог, но протокол съела собака/унес в горы кондор а парень уехал жить к диким племенам. Заранее спасибо.

0

22.10.2023

3 ответов

17 просмотров

Victoria Shipunova

Если Вас это ободрит, это точно возможно:) на сортере Sony мне удалось отделить клетки с NanoLuc: капаешь субстрат в конской дозе в образец и быстро-быстро заталкиваешь на сортировку, ловила в канале FITC, и это реально работает. Но, например, когда проверяла цитометром чистоту популяции клеток, поняла, что зависит от цитометра - два довольно разных Novocyte в разной комплектации по-разному справляются: один люминесценцию видел, второй напрочь нет, у одних и тех же клеток (видимо, немного разные оптические схемы в них).

0

22.10.2023

Abruhmed Автор вопроса

Victoria Shipunova
Если Вас это ободрит, это точно возможно:) на сорт...

Спасибо огромное. А клетки на льду были или комнатная/37?

0

22.10.2023

georgy vladimirovich · Accepted Answer

Я пробовал ловить, результат был невнятный и я особо не стал упираться. Вопрос, думаю, в интенсивности. Ее нельзя усились мощностью лазера. Лазеры, наоборот, будут давать рессеяние и фон. По этому желательно, чтоб лазер которым вы тригерите события и тот, на котором у вас канал для регистрации люминисценции были разнесены в пространстве (просто спектрального отличия, не хватит). Итого, надо чтоб за те несколько десятков мкс, которые у вас считывается сигнал с клетки, она насветила ощутимо больше чем все фоновые засветки. Сколько это в граммах - понятия не имею.

Похожие чаты

Здравствуйте, товарищи. Подскажите пожалуйста, кто-то пробовал сортить клетки по люминесценции,

3 ответов

Похожие вопросы