Коллеги, нужен совет. Есть два антитела, оба красят отлично на

Question

Коллеги, нужен совет. Есть два антитела, оба красят отлично на

цитометрии, оба кролики к сожалению и никак иначе. Как бы мне их покрасить совместно? Конъюгировать с красителем первично? Есть еще варианты/советы? Спасибо ❤️

0

10.10.2024

9 ответов

11 просмотров

Эрик

Нужно насортировать или просто посмотреть, сколько есть двойных положительных клеток? Сами маркеры в большом проценте в целом экспрессированы? Если да, то поиграть с арифметикой: разделить пробы на три части, одну покрасить такими, другую сякими, третью обоими, дальше если в третьей процент просто складывается, то нет двойных положительных. Если процент меньше суммы, то вычесть из суммы реальный процент -- столько двойных положительных.

0

1 месяц назад

Victor Tatarskii Автор вопроса

Эрик
Нужно насортировать или просто посмотреть, сколько...

ага, такое предложили. сорт пока не очень вариант, но мы сделаем в будущем, там будет огонечек

0

1 месяц назад

Irina Linge

Я делала такое в гистохими со вторичными FAB антителами (но у меня такие только против крысы есть). Предварительно инкубировала по 15 минут первичные и вторичные в соотнош 1:2, потом красила одной парой, отмывала и красила второй парой. Получалось нормально

0

1 месяц назад

Victor Tatarskii Автор вопроса

Irina Linge
Я делала такое в гистохими со вторичными FAB антит...

о, вот я про такое думал

0

1 месяц назад

Марина Логинова

Irina Linge
Я делала такое в гистохими со вторичными FAB антит...

Мы тоже так пробовали. И при окраске второй парой добавляли даже только вторые вторичные. И все равно антитела крестили.

0

1 месяц назад

georgy vladimirovich

Я красил последовательно, все было ок. Одни первичные- вторичные, отмывка и следующая пара с другими вторичными. Сейчас не помню конкретно эксперимента, но отложилось, что так можно

0

1 месяц назад

Erdem Dashinimaev

georgy vladimirovich
Я красил последовательно, все было ок. Одни первич...

Но наверное на второй итерации, вторичные антитела могли подкрасить и первичные из первой пары? Или неужели все эпитопы надёжно закрылись в первый раз???

0

1 месяц назад

georgy vladimirovich

Erdem Dashinimaev
Но наверное на второй итерации, вторичные антитела...

По памяти все закрылось. Пытаюсь вспомнить, что это было. Я 100% не ручусь, но я бы точно попробовал. И те, что тусклее первыми вроде по логике надо, чтоб вторые побыстрее докрасить.

0

1 месяц назад

Kate Bryushkova · Accepted Answer

Kate Bryushkova

Первичные или с одинаковым флуорохромом?

0

1 месяц назад

Похожие чаты

Коллеги, нужен совет. Есть два антитела, оба красят отлично на

9 ответов

Похожие вопросы